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                線(xiàn)粒體

                MitoLite 線(xiàn)粒體紅色熒光探針

                產(chǎn)品編號:C0802       CAS#:       Ex (nm):575 Em(nm):            分子式: 分子量:C0802        溶劑:DMSO        包裝:500 Tests 供貨狀態(tài):3-5天        儲存條件:低溫避光-20 零售價(jià)格: 1236.00

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                產(chǎn)品描述

                MitoLite 線(xiàn)粒體紅色熒光探針是一種陽(yáng)離子染料,可以通過(guò)線(xiàn)粒體膜電位梯度選擇性地積聚在線(xiàn)粒體中。線(xiàn)粒體指示劑是一種疏水性化合物,很容易透過(guò)完整的活細胞,并在進(jìn)入細胞后被線(xiàn)粒體捕獲。這種熒光線(xiàn)粒體指示劑長(cháng)時(shí)間保留在線(xiàn)粒體中,因為該指示劑帶有細胞保留基團。這一關(guān)鍵特性顯著(zhù)提高了染色效率。它可以很容易地適用于各種熒光平臺,如微孔板分析,免疫細胞化學(xué)和流式細胞術(shù)。它適用于增殖和非增殖細胞,可用于懸浮細胞和貼壁細胞。

                產(chǎn)品編號

                產(chǎn)品名稱(chēng)

                規格

                價(jià)格

                C0802

                MitoLite 線(xiàn)粒體紅色

                熒光探針

                500 Tests

                1236RMB

                操作步驟

                1.準備線(xiàn)粒體染色溶液:

                1.1解凍MitoLite 染料至室溫。

                1.2通過(guò)將20μL500X Mitolite 染料稀釋到10 mL Hanks和20 mm Hepes緩沖液或緩沖液(HBSS)中,制備染料工作溶液。

                注1:20μLMitolite 染料足以用于一個(gè)96孔板。 在<-15℃下分裝并儲存未使用的MitoLite 染料儲備溶液。 保護它免受光照,避免反復凍融循環(huán)。

                注2:熒光線(xiàn)粒體指示劑的最佳濃度根據具體應用而變化。 可以根據特定細胞類(lèi)型和細胞或組織對探針的滲透性來(lái)修改染色條件。

                2.準備和染色細胞:

                2.1對于貼壁細胞:a.在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在裝有適當培養基的培養皿內的蓋玻片上培養細胞。當細胞達到所需的匯合時(shí),加入等體積的染料工作溶液(來(lái)自步驟1.2)。 b.將細胞在37oC,5%CO2培養箱中孵育30分鐘至2小時(shí)。 c.用預熱(37oC)Hanks和20 mM Hepes緩沖液(HBSS)或您選擇的緩沖液(例如濃度為1:1的生長(cháng)培養基緩沖液)替換染料加載溶液或清洗(特別是對于#22679)細胞。用HBSS或生長(cháng)培養基填充細胞孔。 d.使用配有所需濾光片組的熒光顯微鏡觀(guān)察細胞。

                注意:如果細胞看起來(lái)沒(méi)有充分染色,建議增加標記濃度或孵育時(shí)間以使染料積累。

                2.2對于懸浮細胞:將細胞以1000rpm離心5分鐘以獲得細胞沉淀并吸出上清液。在預熱(37℃)生長(cháng)培養基中輕輕重懸細胞沉淀,并加入等體積的染料加工溶液(來(lái)自步驟1.2)。將細胞在37℃,5%CO2培養箱中孵育30分鐘至2小時(shí)。用Hanks和20mM Hepes緩沖液(HH緩沖液)或緩沖液替換染料加載溶液或洗滌(特別是對于#22679)。(例如生長(cháng)培養基濃度為1:1的緩沖液)。用HBSS或生長(cháng)培養基填充細胞孔。使用配有所需濾光片組的熒光顯微鏡觀(guān)察細胞。

                注1:如果細胞看起來(lái)沒(méi)有充分染色,建議增加標記濃度或培養時(shí)間以使染料積累。

                注2:懸浮細胞可以附著(zhù)在用BD Cell-Tak?(BD Biosciences)處理過(guò)的蓋玻片上,并作為粘附細胞染色(見(jiàn)步驟2.1)。



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